Hidayah, Kholilah Nur (2016) Potensi Limbah Visceral Rumah Potong Hewan (RPH) Untuk Produksi Lipase Oleh Isolat Bacillus sp. SK II-5. Undergraduate thesis, Institut Teknologi Sepuluh Nopember.
Preview |
Text
1512100046-Undergraduate_Thesis.pdf - Accepted Version Download (1MB) | Preview |
Abstract
Limbah padat dan cair rumah potong hewan yang langsung
dibuang ke lingkungan tanpa diolah terlebih dahulu berpotensi
mengkontaminasi udara, air dan tanah sehingga menyebabkan
pencemaran yang sulit didegradasi. Salah satu limbah padat
RPH adalah organ visceral dengan kandungan lipid yang tinggi.
Pada prinsipnya limbah RPH juga memiliki potensi untuk
pertumbuhan bakteri termofilik yang mampu menghasilkan
berbagai macam enzim yaitu protease, kitinase dan lipase.
Lipase atau triacylglycerol acylhydrolases (EC3.1.1.3)
termasuk dalam kelas enzim yang mengkatalisis hidrolisis
trigliserida rantai panjang dan merupakan kelompok yang paling
penting dari biokatalisis untuk aplikasi bioteknologi.Lipase dapat
diproduksi dengan menggunakan mikroorganisme sebagai isolat.
Kelompok yeast, fungi, dan bakteri merupakan mikroba penghasil
lipase. Strain bakteri memiliki potensi yang lebih besar untuk
memproduksi lipase karena aktivitas enzim yang lebih tinggi
dibandingkan dengan mikroorganisme lainnya. Tujuan penelitian
ini untuk memanfaatkan limbah padat RPH berupa organ
visceral (intestinum dan rumen) sebagai substrat dalam produksi
lipase oleh Bacillus sp. SKII-5 serta mengetahui konsentrasi
substrat optimum dalam produksi lipase.
Penelitian ini diawali dengan pengujian kualitatif Bacillus
sp. SK II-5 dengan hasil positif sebagai bakteri lipolitik
menggunakan medium tween80 agar medium. Setelah hasil
iiididapatkan dilanjutkan dengan persiapan media kultur dan
aklimatisasi. Sumber karbon utama berasal dari lemak intestinum
dan rumen. Kemudian dilakukan produksi lipase dengan dengan
variasi konsentrasi substrat yaitu 0,11%, 0,21%, 0,31% dan
0,42%. Aktivitas tertinggi crude lipase adalah menggunakan
lemak 0,11% intestinum yaitu 2858.6 U/ml dengan kandungan
protein sebesar 0,102 mg/ml dan substat 0,21% rumen memiliki
aktivitas 3009,3 U/ml dengan kandungan protein sebesar 0,220
mg/ml.
Selanjutnya, dilakukan proses isolasi dan produksi lipase
dengan metode sentrifugasi dan diikuti dengan uji aktivitas
lipase. Selanjutnya dilakukan produksi lipase dengan
menggunakan kedua substrat tersebut, lipase diisolasi
menggunakan metode sentrifugasi dan metode purifikasi
menggunakan presipitasi amonium sulfat bertingkat. Lipase
terkonsentrasi pada 60-75% dengan aktivitas enzim tertinggi
yaitu 1717,3 U/ml dan 1642.6 U/ml. Titik isolektrik lipase adalah
pH 5 dan hasil elektroforesis SDS-PAGE menunjukkan bahwa
lipase yang dihasilkan oleh Bacillus sp. SK II-5 memiliki berat
molekul 43,3 kDa
=======================================================================================================
Solid and liquid waste from slaughterhouses are discharged
directly into the environment without being processed that caused
contamination of air, water and soil. One of solid slaughterhouses
waste is visceral organs which contain high lipid content.
Besides, this waste has function as medium growth of
thermophilic bacteria to produce a wide variety of lipolytic
enzymes, such as protease, chitinase, and lipase.
Lipase or triacylglycerol acylhydrolases (EC3.1.1.3) is the
most important group of biocatalyst for biotechnology. Lipase
catalyze the hydrolysis of long chain triglycerides. Lipases have
emerged as one of the leading biocatalysts with proven potential
for contributing to the multibillion dollar underexploited lipid
technology bio-industry and multifaceted industrial applications.
Lipase could be produced by microorganisms such as yeast,
fungi, and bacteria. Strains of bacteria have a greater potential to
produce lipase because a higher enzyme activity than others. The
aim of this research is utilize solid slaughterhouses waste of
visceral organs (the intestine and rumen) as a substrate to produce
lipase from Bacillus sp. SK II-5 and determine the optimum
substrate concentration to lipase production.
Lipase produce by Bacillus sp. SK II-5 as lipolytic bacteria
which confirmed use tween80 agar medium. After the results
obtained, Bacillus sp. SK II-5 inoculated to starter preparation
and acclimatization. Carbon source was provided by fat which
isolated from the tissue of bovine intestine and rumen. Substrate
vwith variation of concentration is 0.11%, 0.21%, 0.31% and
0.42%. The highest lipase activity was determined from substrate
0.11% intestine and 0.21% rumen fat with activity 2858.6 U/ml
and 3009.3 U/ml, respectively. Lipase was isolated by
centrifugation method and to precipitate lipase by ammonium
sulfate, experiment conducted with 15-30%, 30-45%, 45-60%,
60-75% and 75-90%, Results revealed that 60-75% saturation
was proved to be effective for maximum specific activity of
1717.3 U/ml and 1642.6 U/ml. Isoelectric point of lipase is pH 5.
The molecular weight of lipase which produced by Bacillus sp.
SKII-5 is 43,3 kDa by SDS-PAGE
| Item Type: | Thesis (Undergraduate) |
|---|---|
| Additional Information: | RSB 572.76 Hid p-1 |
| Uncontrolled Keywords: | Bacillus sp. SK II-5, Lipase, Lipid, Organ Visceral. |
| Subjects: | Q Science > QH Biology |
| Divisions: | Faculty of Science and Data Analytics (SCIENTICS) > Biology > 46201-(S1) Undergraduate Thesis |
| Depositing User: | Mr. Tondo Indra Nyata |
| Date Deposited: | 22 Apr 2020 02:22 |
| Last Modified: | 22 Apr 2020 02:22 |
| URI: | http://repository.its.ac.id/id/eprint/75875 |
Actions (login required)
 |
View Item |